Иммуногистохимия эндометрия что показывает: что это такое, как проводится анализ – особенности подготовки к процедур, что она дает, когда назначается, расшифровка результатов

  • 23.02.2021

Содержание

Иммуногистохимическая диагностика хронического эндометрита (фаза пролиферации)

Комплексное иммуногистохимическое исследование экспрессии специфических иммунологических маркеров хронического эндометрита (натуральных киллеров CD56 и CD16, B-клеток (CD20), плазматических клеток (CD138) и активированных лимфоцитов (HLA-DR), позволяющее провести более точную диагностику и спрогнозировать течение процесса, оценить эффективность проводимой терапии и провести ее коррекцию.

Синонимы русские

Иммуногистохимическое исследование биоптата эндометрия.

Синонимы английские

Immunohistochemical analysis of endometrial biopsies.

Метод исследования

Иммуногистохимический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Образец ткани (в парафиновом блоке).

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Иммуногистохимия – это метод исследования тканей и клеток, основанный на обнаружении специфических антигенов с помощью присоединения к ним антител, меченных флюорохромом или ферментом. Антигены – молекулы белков или углеводов, имеющие уникальную трёхмерную структуру, способные индуцировать образование антител. Антитела – это иммуноглобулины, распознающие антигены и присоединяющиеся к ним во время реакции «антиген-антитело». Антигены и антитела – это молекулы, неразличимые при исследовании методом световой и электронной микроскопии. Для обнаружения специфических антигенов к образцу ткани или клеток добавляют реагент, содержащий меченные флюорохромом или ферментом антитела, в результате чего образуется иммунный комплекс «антиген-антитело». Комплексы формируют специфическое окрашивание тканей и клеток, обеспечивая детекцию патологических изменений на молекулярном уровне. Иммуногистохимическое исследование позволяет верифицировать онкологические заболевания, метастатические поражения,  определить их гистологический подтип, экспрессию биомаркеров, определяющих прогноз заболевания и схему лечения.

Эндометрий – это слизистая оболочка, выстилающая полость матки изнутри, необходимая для имплантации оплодотворенной яйцеклетки и развития плаценты во время беременности. Он подвергается динамическим структурным и функциональным изменениям во время менструального цикла под действием женских половых гормонов. Для исследования эндометрия в фазе пролиферации материал для исследования забирается с 5 до 14 день менструального цикла. Пролиферативная фаза прекращается в момент овуляции, когда зрелая яйцеклетка выходит из фолликула яичника в маточную трубу. Под действием гормона желтого тела яичника – прогестерона приостанавливается рост желез эндометрия и стромы, начинается секреторная фаза, характеризующаяся образованием вакуолей секретом в клетках желез (15-18 день). Позже секрет выделяется в просвет желез, формируется гипертрофия стромальных клеток, появляются видимые спиральные артериолы. Морфологические изменения сопровождаются небольшой нейтрофильной и лимфоцитарной инфильтрацией.

Ряд патологических состояний нарушает нормальное циклическое функционирование эндометрия у женщин репродуктивного возраста. Наиболее распространенными причинами считаются хронический эндометрит, полипы эндометрия, ановуляция и миома матки.

Хронический эндометрит – это воспалительное заболевание эндометрия, чаще поражающее женщин репродуктивного возраста, но встречающееся и в постменопаузе. Факторами риска являются воспалительные заболевания органов малого таза, внутриматочные контрацептивы (спирали), хирургические манипуляции в полости матки (выскабливание), недавняя беременность. Возбудителями заболевания чаще всего являются Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus agalactiae, Mycoplasma hominis

 и различные вирусы. Наиболее распространенный симптом – маточные кровотечения, не связанные с менструацией. Кроме того, хронический эндометрит может быть причиной бесплодия и самопроизвольного прерывания беременности.

Золотым стандартом диагностики хронического эндометрита является гистологическое исследование биоптата эндометрия. Главным маркером является инфильтрация стромы эндометрия плазматические клетками (CD138). Также часто обнаруживаются и другие воспалительные элементы: нейтрофилы (обычно в поверхностном эпителии и железах), субэпителиальные лимфоцитарные инфильтраты, гистиоциты с гемосидерином и редкие эозинофилы.

Поскольку эпизодические плазматические клетки обнаруживаются и в поздней секреторной фазе, и в строме полипов эндометрия, их присутствие не всегда означает инфекционную этиологию. В очень редких случаях обнаружение плазматических клеток в биоптате эндометрия может свидетельствовать о лимфопролиферативном заболевании. 

Для дифференциальной диагностики используется метод иммуногистохимии, позволяющий определить маркеры хронического эндометрита на молекулярном уровне и идентифицировать воспалительные клетки (плазматические клетки CD138), натуральные киллеры CD56 и CD16, B-клетки (CD20) и активированные лимфоциты (HLA-DR).

При верификации диагноза назначается специфическая антибактериальная терапия. По результатам исследования можно оценить эффективность проводимой терапии, определить показания к ее коррекции.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики хронического эндометрита;
  • для дифференциальной диагностики причин маточных кровотечений, не связанных с менструацией;
  • для определения причин бесплодия или самопроизвольного прерывания беременности;
  • для дифференциальной диагностики лимфопролиферативных заболеваний с поражением матки.

Когда назначается исследование?

  • При подозрении на хронический эндометрит, особенно при наличии факторов риска в анамнезе: воспалительные заболевания органов малого таза, внутриматочные контрацептивы (спирали), хирургические манипуляции в полости матки (выскабливание), недавняя беременность;
  • при маточных кровотечениях, не связанных с менструацией;
  • при бесплодии;
  • при самопроизвольном прерывании беременности;
  • для исключения противопоказаний перед проведением экстракорпорального оплодотворения (ЭКО).

Что означают результаты?

Исследование назначается при наличии клинико-анамнестических данных и по результатам предварительно проведенного гистологического исследования.

Структуры эндометрия, соответствующие фазе пролиферации, наблюдаемые в физиологических условиях в первую половину 2-фазного менструального цикла могут отражать гормональные нарушения, если их обнаруживают во второй половине цикла (это может указывать на ановуляторный, однофазный цикл или на ненормальную, удлиненную фазу пролиферации с запоздавшей овуляцией при двухфазном цикле), при железистой гиперплазии эндометрия в различных участках гиперплазированной слизистой оболочки матки и при дисфункциональных маточных кровотечениях у женщин в любом возрасте.

Обнаружение специфических маркеров (натуральных киллеров CD56 и CD16, B-клеток CD20), плазматических клеток (CD138) и активированных лимфоцитов (HLA-DR) в биоптате эндометрия в пролиферативную фазу свидетельствует о хроническом эндометрите.

 Скачать пример результата

Важные замечания

  • Для исследования эндометрия в фазе пролиферации материал забирается с 5-го по 14-й день менструального цикла.
  • Противопоказаниями к проведению любого вида биопсии эндометрия являются: беременность, острые инфекции мочеполовых органов, воспалительные заболевания органов малого таза – половых и мочевыводящих, значительные нарушения свертываемости крови.

Кто назначает исследование?

Гинеколог, репродуктолог.

Также рекомендуется

Литература

1) Techniques of immunohistochemistry: principles, pitfalls, and standardization. Richard W. Cartun, Clive R. Taylor and David J. Dabbs. Diagnostic Immunohistochemistry, Chapter 1, 1-46.

2) Benign Endometrium. David W Kindelberger  and Marisa R Nucci. Gynecologic Pathology: A Volume in the Series: Foundations in Diagnostic Pathology, Chapter 6, 197-232.

3) The Female Genital Tract. Lora Hedrick Ellenson and Edyta C. Pirog. Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease, Chapter 22, 991-1042.

4) Immunohistochemical analysis of CD56-positive natural killer cells in the human endometrium. Maja Weber, Bettina Toth, Isabel Santillan, Christin Bär, Ekkehard Schleußner  and Udo R. Markert. Journal of Reproductive Immunology, 2016-06-01, Volume 115, Pages 79-80.

5)  Genital Tract Infections: Vulva, Vagina, Cervix, Toxic Shock Syndrome, Endometritis, and Salpingitis. Carolyn Gardella, Linda O. Eckert and Gretchen M. Lentz Comprehensive Gynecology, 23, 524-565.

что это такое, где сделать, цена

Иммуногистохимия – это специальный анализ для определения ракового заболевания. С его помощью находят антигены, выделяемые определённым видом раковых клеток. Вдобавок с помощью иммуногистохимии прослеживается реакция антигенов на лечение. Анализ составляет основу диагностики и терапии в современной онкологии.

Как работает метод

В названии метода соединились три отрасли – иммунология, гистология и химия. Для анализа используют химические вещества. Реактивы насыщены антителами, находящими раковые антигены. Антитело – это белок, его структура притягивает антиген. Белок окрашивают ферментами, красителями, которые проявляются при положительной реакции.

Теоретические основы иммуногистохимии заложены в 40-е годы 20-го века. С помощью флуоресценции находили антигены в замороженных клетках. Затем стали использовать окрашенные ферментами антитела. Установили соответствия цветовой реакции и типа раковых клеток. Также определили гормоны и их рецепторы.

Практическое применение методов ИГХ:

  • Определение типа клеток;
  • Изучение секреторных внутриклеточных процессов и особенностей клеточного синтеза;
  • Определение гормонов и гормональных рецепторов.
Клетки под микроскопом после иммуногистохимииКлетки под микроскопом после иммуногистохимии

Клетки под микроскопом после иммуногистохимии

Виды:

  • Прямой метод – маркированные антитела соединяются с искомыми антигенами.
  • Непрямой, «антиген-антитело» – неотмеченные антитела находят антигены, потом их соединения обнаруживают вторичные отмеченные антитела.

Цвет реакции показывает статус опухоли.

Цель метода

Иммуногистохимическое исследование отвечает на три вопроса.

Что это такое

Специфический анализ помогает выяснить строение раковой клетки и идентифицировать по гистологическим признакам, к какому классу относится новообразование.

Где оно находится

Если точная локализация опухоли неизвестна, с помощью иммуногистохимии находят расположение по метастазу.

Как это лечить

С помощью анализа видна реакция антигенов на вещества препаратов химиотерапии. Так удаётся оценить, окажется ли действенным лечение указанным способом. Установить, к каким препаратам рак устойчив, можно прежде, чем химия попадет в организм человека. Таким образом, пациента избавляют от лишней интоксикации, а сразу назначают лекарство, о действенности которого заведомо известно. Если рак устойчив к химиотерапии, предстоит выбрать другой метод лечения.

Это помогает в лечении эстрогенозависимых опухолей при раке молочной железы.

Рак молочной железыРак молочной железы

Сложная структура железистых клеток включает признаки новообразований различной степени агрессивности. Эти опухоли бывают устойчивыми к химиотерапии и гормонам. Насколько агрессивно развивается опухоль, возможно установить по маркеру пролиферации в иммуногистохимическом тесте.

Как проходит процедура

На иммуногистохимический анализ попадает образец ткани, взятый с помощью биопсии. Это способ забора биоматериала с помощью тонкой иглы. Её вводят в тело пациента и шприц-системой втягивают ткань опухоли. Образец проходит подготовку:

  • Фиксация с помощью парафина.
  • Изготовление срезов.
  • Распределение срезов по стеклам.
  • Обработка образцов антителами и красителями.

Перед исследованием биоматериал хранится в формалине. Это позволяет использовать единственный образец долгое время, чтобы не травмировать пациента. Биопсия бывает болезненна, если опухоли расположены в труднодоступных местах. Злокачественные образования в головном мозге по возможности удаляют оперативно, на анализ попадает непосредственно опухоль. Важно сохранить материал, так как опухоли бывают размером до 1 см. По результатам теста строится программа лечения. Впрочем, в этом случае иммуногистохимия обладает преимуществом.

Работа с материалом биопсииРабота с материалом биопсииРабота с материалом биопсииРабота с материалом биопсии

Работа с материалом биопсии

Положительные и отрицательные стороны

Преимущества метода:

  • Требуется минимум биоматериала и реактивов;
  • Определяет рак на ранней стадии;
  • Быстрый результат;
  • Точность и достоверность.

Дополнительное преимущество – в возможности трехмерного моделирования. Ответная реакция на антитела видна через три часа. Окончательное заключение дается через 7-10 дней. По истечении этого времени будет точно установлен тип рака и стадия заболевания, а также его первичный очаг. Изменение цвета маркеров обычно не имеет разночтений при постановке диагноза. На итоговом бланке прописывают расшифровку результатов.

Достоверность зависит от метода окрашивания образца реактивами. Это делается автоматически и вручную. При ручном методе не исключён человеческий фактор, ошибки лаборантов. Лечащий врач подскажет, в какую лабораторию обратиться. Пациент может самостоятельно поинтересоваться, как проводится анализ в конкретном учреждении. Для достоверности результата он может проводиться повторно или в двух лабораториях.

Погрешность в результате возникает по вине пациента. Перед биопсией следует отказаться от гормональных препаратов и других лекарств, от физических нагрузок, придерживаться диеты. Внешние факторы влияют на результаты.

Диетические продукты для больногоДиетические продукты для больного

Применение метода в диагностике

Показания к анализу:

  • Патологии репродуктивной системы, бесплодие;
  • Активный опухолевый рост любой локализации.

Противопоказаний к анализу нет. Порой невозможно получить биоматериал для исследования из-за расположения опухоли.

Иммуногистохимия эндометрия – важное исследование для нахождения причин бесплодия. Его цель – найти антиспермальные клетки, препятствующие оплодотворению. Причиной бесплодия становится нечувствительность эндометрия к гормонам во время овуляции. При этом показатели гормонального фона в норме, антиспермальных тел нет. Иммуногистохимическая диагностика выявляет, что проблема в рецепторах эндометрия.

Трудно поддаются диагностике тимомы. Их деление на злокачественные и доброкачественные условно. Всё зависит от конкретного случая. Статус опухоли вилочковой железы, тимуса показывает исследование на антитела.

ИГХ при раке прямой кишки применяется, чтобы установить эпителиальный или эндокринный характер опухоли, наследственный фактор и прогноз. Методика определяет первичное ли заболевание и метастазы.

Расшифровка результатов основана на показателе степени злокачественности. Чем он выше, тем менее благоприятный прогноз. Патология – 85% содержания маркера, означает последнюю стадию заболевания с метастазами. Менее 10% – норма, благополучный исход лечения.

Другие маркерные методы

Онкологический диагноз всё же редко ставят по результатам единственного исследования.

Гистологический

Второй информативный анализ – гистология. Метод отличается от иммуногистохимии тем, что даёт представление только о клеточном строении. Гистологическим способом выделяют в одном материале несколько различных структур, к примеру, аденокарциномы. Злокачественное образование формируется из железистой ткани, которое выделяет жидкость. Исходя из типа жидкости, выделяют серозную и слизисто-секреторную. Клетки аденокарцином располагаются фолликулярно или папиллярно. Опухоль бывает твердой или с включениями цист, и уже классифицируется как цистаденокарцинома. Об этих характеристиках узнают по результатам гистологического исследования и корректируют лечение под конкретный тип опухоли.

Технология такая же, как при иммуногистохимии. Берут материал с помощью биопсии, покрывают парафином и разрезают образец на тонкие пластины. Готовые препараты также окрашивают, после чего патоморфолог изучает их под микроскопом.

Недостатки гистологического исследования – длительные сроки ожидания результата планового анализа, 10-14 дней. Срочный анализ делают за 30 мин.

Окрашенный препарат для изученияОкрашенный препарат для изучения

Окрашенный препарат для изучения

Метод МГМ

Ещё один анализ, в основе которого лежит реакция на маркеры – молекулярно-генетический. Помогает установить отклонения в ДНК злокачественной опухоли, влияющие на её метастатическую и инвазивную активность, а также наличие наследственной предрасположенности или спорадической, спонтанной природы образования.

Гистология и иммуногистохимия – два основных метода постановки диагноза при раке, подтверждающие друг друга. Разница в результатах редка, так как иммуногистохимия включает исследование клеточного строения.

Часто после гистологического исследования лимфоузла пациента дополнительно направляют на иммуногистохимию. Под микроскопом материал изучает эксперт, который может что-то упустить. Либо структуру сложно идентифицировать. Метод ИГХ – помощь в спорной ситуации.

Лаборатории и стоимость

В России есть лаборатории, где можно сделать тест на иммуногистохимию.

Лаборатория компании «ЮНИМ», Инновационный центр Сколково, Москва – 28300 р. любой сложности, 19000 при раке молочной железы, срок 3 дня.

Лаборатория «Мелайн-Сервис», Москва:

  • 6560 р. анализ на 1 антитело;
  • 15980 р. анализ мягкотканных опухолей 6-10 антител;
  • 27350 р. сложный анализ на 11-14 антител;
  • 12620 р. – стандартное исследование молочной, предстательной железы, определение статуса эндометрия, 2-5 антител.

Центр молекулярной диагностики в Москве и с филиалами в регионах РФ:

  • 5170 р. – 1 антитело;
  • 12500 р. – 5 антител;
  • 24000 р. – 10 антител.

Стоимость зависит от сложности исследования и вида рака.

Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса эндометрия (стадия секреции, расширенное) (PR, ER, CD56, CD138, LIF)

Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса эндометрия (стадия секреции, расширенное (PR, ER, CD-56, CD-138, LIF)) — исследование биоптата ткани, меченого антителами, под микроскопом. Анализ выполняется для определения рецепторного статуса эндометрия. 

ИГХ-исследования проводят после выполнения гистологического исследования.

Иммуногистохимическое исследование  
Вид морфологического исследования тканей, полученных в ходе биопсии, и меченых специфическими антителами. В основе метода лежит принцип взаимодействия «антиген-антитело». Ткань, в которой происходит патологический процесс, экспрессирует антигены. При нанесении на образец ткани антител, образуется комплекс антиген-антитело. Благодаря меткам, он становится доступным для визуализации. Врач-патоморфолог изучает количество клеток, окрашенных маркёром. Он определяет в исследуемой ткани локализацию клеток, гормонов и их рецепторов, ферментов, иммуноглобулинов, компонентов клеток и отдельных генов.

Хронический эндометрит

Хронический эндометрит — это клинико-морфологический синдром, при котором возникают функциональные и структурные изменения слизистой полости матки вследствие повреждения клеток эндометрия инфекционным агентом. Хронический эндометрит может протекать без отсутствия клинических признаков. Он часто является причиной нарушения репродуктивной функции, вплоть до бесплодия.

По этиологическому фактору хронический эндометрит бывает специфическим (с выявлением инфекции) или неспецифическим (полимикробной ассоциации).

Факторы риска развития хронического эндометрита: 

  • Инфекционно-воспалительный процесс в малом тазу.
  • Наличие внутриматочной спирали.
  • Инфекции влагалища и шейки матки.
  • Бактериальный вагиноз.
  • Деформации полости матки с нарушением циклического отторжения эндометрия.
  • Инвазивные вмешательства в полость матки.
  • Лучевая терапия в области органов малого таза.
  • Раннее начало половой жизни.
  • Курение.
  • Употребление алкоголя.
В результате воздействия патологического фактора развивается воспалительная реакция, которая является универсальным способом защиты в организм. Про хроническом эндометрите возникает воспаление в интерстициальной ткани. Оно проявляется инфильтраций макрофагами, лимфоцитами, плазматическими клетками и фиброзом ткани. На местном уровне наблюдается активация цитокинов-медиаторов воспаления. Цитокины способствуют дополнительному привлечению в зону воспаления лимфоцитов, активации нейтрофилов и макрофагов. В результате воспаления наблюдается повреждение эпителия, нарушение его пролиферации и нормальной циклической трансформации.

«Золотой стандарт» в диагностике хронического эндометрита это гистологическое исследование.
Диагноз выставляется врачом-патоморфологом на основании изучения биоптатов эндометрия. Морфологически заболевание проявляется инфильтрацией стромы эндометрия плазматическими клетками.

В настоящее время воспалительные заболевания органов малого таза относят к аутоиммунному процессу, который протекает как самоподдерживающаяся патологическая реакция.

Иммуногистохимическое исследование определяет характер иммунологических нарушений. Анализ выявляет пациенток с аутоиммунным воспалением и аутоиммунным ответом в эндометрии, что определяет тактику их ведения.

Рецепторы к эстрогену (ER) и прогестерону (PR)
Эстроген и прогестерон — основные женские половые гормоны. Они вырабатываются яичниками и являются основными регуляторами деятельности репродуктивной системы женщины.

Рецепторы присутствуют в различных тканях, в том числе в молочных железах и матке.

Рецепторы к эстрогену (ER) и прогестерону (PR) являются веществами белковой природы, которые локализованы на поверхности опухолевой клетки. Под влиянием женских половых гормонов, рецепторы формируют комплекс, который стимулирует появление новых опухолевых клеток. Разрушение этого механизма лежит в основе гормонотерапии.

Иммуногистохимическое определение ER и PR способно повести дифференциальную диагностику характера опухоли, выявить чувствительность опухоли к гормонам. Анализ позволяет скорректировать и уточнить лечение, а также оценить эффективность.

Опухоли с высоким содержанием рецепторов к эстрогенам и прогестерону являются высокодифференцированными. Они обладают низкой пролиферативной активностью и характеризуются не агрессивным течением. Опухоли с такими показателями хорошо отвечают на гормональную терапию и имеют хороший прогноз. Эффективность гормональной терапии составляет около 50% при опухолях, экспрессирующих рецепторы к эстрогенам, и 75% при опухолях, экспрессирующих рецепторы к обоим гормонам.

Если опухолевые клетки имеют низкое число рецепторов к эстрогенам, гормональная терапия обычно неэффективна. Исключение составляют случаи, когда опухолевые клетки экспрессируют рецепторы только к прогестерону. При таком варианте гормональная терапия эффективна у 10% таких больных.

CD-56
CD-56 — прототипный маркёр ЕК-клеток. Помимо ЕК-клеток присутствует на эмбриональных, мышечных, нервных, эпителиальных клетках, некоторых активированных Т-клетках. CD-56 позитивны такие гематологические опухоли, как ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, анапластическая крупноклеточная лимфома, плазмоклеточная миелома (плазмоклеточная лейкемия CD-56 негативна). Это молекулы адгезии клеточной поверхности, которые облегчают гемофильную адгезию и участвуют в контактном ингибировании роста, ЕК-клеточной цитотоксичности, развитии нервных клеток.

CD-138
Это маркёр плазматических клеток. Его определение показано при неполной морфологической картине хронического эндометрита.

LIF 
LIF — лейкемия-ингибирующий фактор — продуцируется различными типами клеток, в том числе Т-клетками, клетками миеломоноцитарной линии, фибробластами, клетками печени, сердца и меланомы. LIF в течение длительного времени поддерживает эмбриональные стволовые клетки в недифференцированном состоянии, подавляя спонтанную дифференцировку. Кроме того, LIF обладает свойствами стимулировать синтез белков острой фазы в гепатоцитах, стимулировать дифференцировку холинергических нервов и подавлять адипогенез ингибируя липопретеинлипазу в адипоцитах. В эндометрии здоровых женщин экспрессия LIF резко возрастает в середине секреторной фазы, совпадая с предполагаемым окном имплантации.

Эндометрий бесплодных женщин и женщин с необъяснимым рецидивирующим выкидышем синтезирует значительно меньше LIF и его рецепторов (LIFR и gp130) в период рецептивности по сравнению со здоровыми женщинами. Обнаружена связь мутаций гена LIF и наличия антифосфолипидных антител у бесплодных женщин: у 100% женщин с мутациями гена LIF детектировались антифосфолипидные антитела, тогда как у бесплодных женщин, без этого вида мутаций, частота выявления антифосфолипидных антител составила 30% (p = 0,0035). LIF-R необходим для нормального развития мотонейронов в головном и спинном мозге. При нарушениях гена LIF-R, в эксперименте отмечают дефекты развития плаценты, скелета, нервной системы у эмбрионов, приводящие к перинатальной смерти. Возможные области использования этого маркёра — в изучении таких видов патологии, как онкологические, аутоиммунные и воспалительные заболевания в качестве диагностического инструмента, а также для мониторинга и терапевтического вмешательства.

Показания к проведению ИГХ-исследования:

  • рак молочной железы — для оценки гормональной чувствительности опухоли, уточнения прогноза и выбора метода лечения;
  • первичное/вторичное бесплодие — для оценки потенциальной способности эндометрия к нидации (имплантации) плодного яйца; 
  • рак тела матки — для оценки гормональной чувствительности опухоли, уточнения прогноза и выбора метода лечения; 
  • нарушения менструального цикла, дисфункция яичников, гиперплазия эндометрия — в качестве дополнительного исследования для оценки потенциальной эффективности гормональной терапии.
Подготовка
Подготовка определяется лечащим врачом.

Диагностическое выскабливание слизистой оболочки матки рекомендовано проводить в среднюю и позднюю фазу пролиферации — на 7–10-й день менструального цикла.

Интерпретация результатов
Единицы измерения: проценты (%).

Интерпретация: описательный ответ с указанием процента клеток, в которых определяется ЭР и ПР, CD56, LIF. Даётся подсчет пиноподий.

Референсные значения: диапазон значений индивидуален, зависит от фазы менструального цикла, анамнеза, проведённого лечения и клинического диагноза.

Форма выдачи результата

Проводится морфологическая оценка состояния эндометрия или морфологическая оценка опухоли молочной железы согласно классификации ВОЗ (2012).

Проводится подсчёт количества окрашенных ядер клеток желёз эндометрия, учитывается процентное соотношение окрашенных/неокрашенных ядер клеток на 100 учтённых клеток в 10 репрезентативных полях зрения при 40-кратном увеличении.

Иммуногистохимия при ЭКО | Unim

При планировании беременности методом ЭКО важно пройти все необходимые процедуры обследования. Это поможет врачу правильно подготовить организм пациентки к зачатию и вынашиванию беременности.

Одной из таких диагностических процедур является иммуногистохимия. Иммуногистохимия при ЭКО проводится при наличии первичного или вторичного бесплодия. Гистология при ЭКО также является важной частью диагностики, она проводится одновременно с иммуногистохимией. ИГХ необходима, чтобы оценить потенциальную способность эндометрия к имплантации (нидации) плодного яйца. Гистология включает в себя исследование структуры поверхностного эпителия эндометрия.

ИГХ ЭКО определяет наличие благоприятных и неблагоприятных критериев наступления беременности. К негативным критериям относят персистирующую гиперэкспрессию ЭРα в среднелютеиновую фазу менструального цикла, а к позитивным — соотношение прогестероновых и α-эстрогеновых рецепторов (ПР/Эрα), соответствующее морфологической структуре эндометрия и количество клеток поверхностного эпителия в эндометрии с наличием пиноподий ≥50%. При первичном и вторичном бесплодии наблюдается снижение количества прогестерон-позитивных стромальных клеток, повышенная экспрессия α-эстрогенов в железистых и стромальных клетках.

Также при проведении иммуногистохимии возможно оценить восприимчивость рецепторов к эндогенным гормонам, и в соответствии с этим скорректировать дозу препаратов при подготовке к циклу ЭКО.

Для проведения иммуногистохимии необходим образец ткани эндометрия. Его получают при процедуре, называемой биопсия. Затем этот образец ткани помещают в специальный раствор и доставляют в патоморфологическую лабораторию, где его подготавливают к исследованию. После подготовки готовый образец в виде гистологических стекол попадает к врачу-патоморфологу, который изучает его под микроскопом и ставит диагноз.

В диагнозе указывается морфологическое описание клеток эндометрия, а также результаты ИГХ-реакции на рецепторы гормонов (прогестерона, эстрогена) в ядрах клеток эпителия желез и стромы, а также указывается экспрессия рецепторов в эндометрии и общая оценка .

Также иммуногистохимическое исследование при ЭКО может быть направлено на определение клеток-киллеров, создающих препятствия беременности. К ним относят CD4 (В-ХЛЛ) , CD8 (Т-лимфоциты-киллеры/супрессоры) ,СD16 (NK-клетки, естественные клетки-киллеры), CD56 (часть Т-клеток), CD20 (В-клетки), CD23 (активированные В-клетки), CD38 (В-клетки, активированные лимфоциты).

Иммуногистохимия. Помогите расшифровать. — запись пользователя Ирина (Shkurka) в сообществе ЭКО — мама в категории Эндометрий и все о нем (лечение, наращивание, улучшение)

Девочки, добрый день!

Делала ИГХ. Пришли результаты.

Понимаю, что подтвердился ХЭ и есть проблемы с рецепторами и пиноподиями, но до конца понять реальную картину по результату не могу. И инете тоже очень мало инфы.

Если кто разбирается хорошо, помогите, плиз, расшифровать результат.

Спасибо!

=======================

НАЗНАЧЕННЫЕ ОКРАСКИ: LIF 4/100, Окраска гематоксилином и эозином, CD56, CD138, Estrogen Receptor, Progesterone Receptor.

МАКРОСКОПИЧЕСКОЕ ОПИСАНИЕ: В ПРОВОДКУ ВЗЯТО: 0 1 КУС. Фрагменты серой ткани общими размерами 1х0.5х0.3 см

МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ОПИСАНИЕ: В исследуемом материале фрагменты эндометрия: строма с неравномерным отеком, мелкоочаговые кровоизлияния. Эндометриальные железы извитые, с расширенным просветом, в эпителии желез субнуклеарные вакуоли, ядра вытянутые, расположены на различных уровнях, что соответствует 2-3 дню после овуляции. В строме артерии достигли поверхности, покровный эпителий содержит менее 35% пиноподий. В строме очаговый фиброз, очаговая слабо выраженная лимфоклеточная инфильтрация.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Эндометрий недостаточной фазы секреции с задержкой желез в ранней стадии, очаговый фиброз стромы.

ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ: С парафинового блока деланы срезы и проведены иммуногистохимические реакции с антителами к: PgR (1E2, Roche-Ventana), ER (SP1, Roche-Ventana), CD56 (123C3, Roche- Ventana),CD138 ((B-A38) CD-138/syndecan-1, Roche-Ventana) LIF (Abcam) с помощью иммуногистостейнера Ventana BenchMark ULTRA.

Результаты:

PgR - ядерная реакция в железах эндометрия составляет 209 баллов (выраженная экспрессия по Н-Score)

PgR - ядерная реакция в стромальных клетках эндометрия составляет 135 баллов (умеренная экспрессия по Н-Score)

ER - ядерная реакция в железах эндометрия составляет 210 баллов (выраженная экспрессия по Н-Score)

ER - ядерная реакция в стромальных клетках эндометрия составляет 95 баллов (умеренная экспрессия по Н-Score)

LIF- 5-6 баллов (норма 10) СD56 в строме эндометрия - диффузно расположенные клетки с умеренно выраженной мембранной реакцией, до 6 в поле зрения (норма до 10)

CD138 в строме эндометрия - очагово расположенные клетки с умеренно выраженной мембранной реакцией, до 2 в поле зрения (норма 0)

Положительный контроль позитивный. Отрицательный контроль негативный.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Морфологическая картина недостаточной фазы секреции с задержкой желез в ранней стадии. Данные подтверждаются иммуногистохимически - LIF снижен отмечается гиперэкспрессия рецепторов прогестерона в железах (приближен к ранней секреции) и в строме (уровень соответствует ранней секреции). Гиперэкспрессия эстрогенов в железах (приближен к ранней секреции) и строме (уровень соответствует ранней секреции). Очаговое обнаружение плазматических клеток (CD138) свидетельствует об очаговом хроническом эндометрите.

================================

Иммуногистохимическое исследование (ИГХ) при беременности

Актуальность иммуногистохимических исследований

Развитие вспомогательных репродуктивных технологий эффективно решает проблему бесплодия. Однако, несмотря на уровень развития современной медицинской науки, не все попытки результативны. Одной из основных причин неудач остается отсутствие имплантации эмбриона в слизистую матки. Этот завершающий этап всех процедур ЭКО зависит от качества переносимого эмбриона и состояния внутренней оболочки матки, называемой эндометрием. Причем именно патология эндометрия ответственна за отсутствие имплантации в 30% случаев.

Адекватное функционирование слизистой матки и готовность к имплантации во многом зависят от состояния ее внутриклеточных рецепторов  к стероидным гормонам – эстрогенам и прогестерону. Иммуногистохимическое исследование (ИГХ) материала эндометрия помогает наиболее точно оценить его рецепторный аппарат, а значит и потенциальную способность к успешному прикреплению плодного яйца. Кроме того, этот метод позволяет определить чувствительность эндометрия к гормональным препаратам, назначаемым в программах ЭКО, что чрезвычайно важно при их проведении.

В клинике «Новая жизнь» ИГХ-исследования проводятся как для выяснения факторов воспаления эндометрия, так и для выявления рецепторной активности Прогестерона и Эстрогенов. Процедура довольно проста, в определенный день менструального цикла при помощи Пайпель биопсии берут кусочек эндометрия для исследования. Взятая ткань отправляется в специальную лабораторию для исследования данного материала. Через 6-8 дней вы получите заключение проведенного исследования.

По полученному результату врач определит состояние эндометрия на конкретный день менструального цикла, выяснит, не является ли причиной отсутствия имплантации воспалительный процесс или сдвиг окна имплантации. Т.е. отсутствие готовности эндометрия на данный день менструального цикла имплантировать эмбрион.

 

Понятие о рецептивности и имплантационном окне    

Основная роль в процессе имплантации принадлежит такому свойству эндометрия, как рецептивность. Под этим понятием подразумевают способность последнего наиболее эффективно обеспечить необходимые этапы внедрения эмбриона: ориентацию в полости матки относительно места будущего прикрепления, непосредственно прикрепление к внутреннему слою матки-эндометрию. Чтобы оптимально осуществить все эти последовательные действия, эндометрий и эмбрион должны развиваться синхронно.

Перенос эмбрионов не увенчается успехом, если между степенью их развития и функциональной полноценностью слизистой матки будут различия. Поэтому так важен вопрос определения периода наибольшего соответствия эмбриона и эндометрия. Этот временной промежуток именуют имплантационным окном. Внедрение человеческой бластоцисты в  матку и дальнейшее благополучное развитие  плода до родов возможно только в определенный период.

В другие периоды рецептивность эндометрия недостаточная, и успешный процесс имплантации эмбриона невозможен. Имплантационное окно составляет от 2-х до 4-х суток (20-й – 24-й дни менструального 28 дневного цикла) и характеризуется изменениями в строении эпителия эндометрия: на его поверхности возникают специфические выпячивания – пиноподии.     

 

Преимущества ИГХ

Поскольку наступление беременности во многом зависит от состояния слизистой оболочки матки, то характеристика эндометрия в период имплантационного окна приобретает первостепенное значение. Стандартное гистологическое исследование соскобов и биоптатов не в состоянии предоставить всю необходимую информацию для выбора тактики лечения бесплодия. Так, например, опираясь лишь на результаты гистологии, нельзя достоверно установить недостаточность лютеиновой фазы и сделать выводы о рецептивности эндометрия. Данные гистологического заключения свидетельствуют о клеточном изменении эндометрия в соответствии с менструальным циклом и наличии морфологических изменений , но не определяют количество рецепторов Прогестерона и Эстрогена , которые влияют на готовность матки принять эмбрион.  

Окончательным и информативным этапом диагностики состояния эндометрия и оценки его рецепторного аппарата является использование иммуногистохимического метода. Это исследование необходимо при выборе лечебных мероприятий пациенткам после неудач программ ВРТ и при назначении высоких дозировок гормональных препаратов в протоколах ЭКО. Также ИГХ позволяет объективно судить о восприимчивости слизистой матки к воздействию собственных гормонов и принимаемых гормональных препаратов, а значит делает возможным дифференцированный подход к лечению каждой женщины, страдающей бесплодием.

 

Что изучают при проведении ИГХ

Объектом для исследования является биоптат слизистой тела матки, получаемый при помощи аспирационной кюретки. Процедура забора безболезненна и успешно проводится в нашей клинике без предварительной анестезии. Когда проводить забор материала для иммуногистохимического анализа, решает специалист клиники индивидуально для каждой пациентки.

Выбор фазы и конкретного дня менструального цикла зависит от цели исследования и задач, которые хочет решить врач, при исследовании нарушений имплантации ,чаще это 18 – 22 дни стандартного цикла. При исключении воспалительного процесса 9-10 день менструального цикла.

В нашей клинике при подозрении сдвига окна имплантации мы проводим ИГХ исследование как в натуральном цикле ( если женщина овулирует) и в цикле ЗГТ ( если у пациентки отсутствует овуляция).

При ИГХ изучают и описывают морфологию, то есть форму и строение, эстрогеновых и прогестероновых рецепторов эндометрия при помощи окраски антител к данным гормонам, вычисляют коэффициент , а главное, оценивают экспрессию или чувствительность этих рецепторов к данным половым гормонам в эпителиальных железах и клетках стромы.

Исследуют многочисленные иммуногистохимических маркеры: Кi67, циклин Е, Р27 и другие. Показатели экспрессии каждого из этих белков, регулирующих клеточный цикл, помогают врачу клиники при выборе тактики лечения пациенток с бесплодием различного происхождения, в том числе, спровоцированного патологией эндометрия.       

Дополнительная информация

Микрофлора женских половых органовМикрофлора женских половых органов

В этой статье речь пойдет о женских проблемах в репродуктивном возрасте ( 18- 45 лет), т.к. в подростковом и перименопаузальном периоде, появляются свои особенности, которые необходимо учитывать в лечении.

Лечение бесплодия у мужчинЛечение бесплодия у мужчин

Поставить диагноз мужчине наиболее просто. После 2-3 дней воздержания сдают сперму на исследование и через час уже готов анализ и исследована репродуктивная функция.

Лечение бесплодия у женщинЛечение бесплодия у женщин

В семье первой «бьет тревогу» женщина. И часто без мужа приходит на прием к врачу репродуктологу. При доступности всемирной паутины, форумов и сайтов на прием приходят уже с анализами и самостоятельно поставленными диагнозами.

Будущий папаБудущий папа

Перед планируемым зачатием нужно подумать о здоровом образе жизни.

КонтрацепцияКонтрацепция

В клинике «Новая Жизнь» вы можете получить консультацию высококлассных врачей гинекологов-эндокринологов по наиболее подходящему для вас методу контрацепции.

Иммуногистохимическое исследование определения рецептивности эндометрия «Окна имплантации» (кол-во ER, PgR, СD56, CD138 , LIF рецепторов, в т.ч. подсчет кол-ва пиноподий). Взятие б/м только на 20-22 день цикла. — сдать анализ в г. Томск: цена, расшифровка

Иммуногистохимическое исследование (ИГХ) – особый метод идентификации специфических антигенных свойств опухолевых заболеваний. Иммуногистохимические методы используются для выявления локализации тканевого компонента (антигена) посредством связывания его с мечеными антителами и являются неотъемлемой частью современной диагностики рака.
Опухолевые клетки продуцируют специфические белки (антигены), которые способны связываться с определенными антителами.
Рецепторы к эстрогенам (ЭР) и прогестерону (ПР) относятся к внутриклеточным рецепторам стероидных гормонов. Они присутствуют в различных тканях-мишенях, в том числе матке, где участвуют в механизмах гормональной индукции синтеза матричной РНК, белков, высвобождении цитокинов и факторов роста.
ЭР и ПР вовлечены в механизм развития и метастазирования опухолей. Их исследование используется в диагностике и прогнозе развития следующих патологических состояний: нарушения женской репродуктивной функции, бесплодие, гиперплазия эндометрия, злокачественные заболевания тела матки.
Гиперплазия эндометрия: уровень экспрессии ЭР и ПР при простой железистой гиперплазии эндометрия без атипии не зависит ни от возраста женщины, ни от наличия неопухолевой гинекологической патологии (хронического эндометрита, полипов эндометрия, фолликулярных кист яичников).
Бесплодие: стероидная рецепция эндометрия при бесплодии существенно меняется. Исследование рецепторов ЭР и ПР позволяет оценить потенциальную способность эндометрия к имплантации плодного яйца.
Гормонально-рецепторный статус – важнейшая характеристика, определяющая клиническое течение заболевания и выживаемость больных эндометриоидным раком тела матки. Неопухолевая гинекологическая патология (хронический эндометрит, полип эндометрия, наличие фолликулярных кист яичника) не влияет на рецепторный статус эндометрия.

alexxlab

E-mail : alexxlab@gmail.com

Submit A Comment

Must be fill required * marked fields.

:*
:*